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    無菌實驗室凈化-甘肅久信

    無菌室一般是在微生物實驗室內專辟的一個小房間,面積不宜過大,約4m2~5m2,高2.5m左右即可。無菌室外要設一個緩沖間、凈化風淋間…

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           無菌室一般是在微生物實驗室內專辟的一個小房間,面積不宜過大,約4m2~5m2,高2.5m左右即可。無菌室外要設一個緩沖間、凈化風淋間及更衣間。無菌室和緩沖間都必須密閉。

           室內裝備必須有空氣過濾裝置。無菌室和緩沖間都裝有紫外線燈,無菌室的紫外線燈距離工作臺面1m。無菌室內的地面、墻壁必須平整,不易藏污垢,便于清潔。工作臺的臺面必須處于水平狀態。工作人員進入無菌室應在更衣室穿戴好滅菌的衣、帽、鞋,經過凈化風淋室,再到緩沖間,然后進入無菌室進行檢驗工作。           縣級市的企業一般實驗室多使用小型超凈工作臺。超凈工作臺其結構簡單,便于移動,工作臺內有紫外燈和凈化風機,外部是推拉式小門或開兩個洞的玻璃門,操作時將雙臂伸進去即可。對于無菌室一般有如下的要求: 

    (1)無菌操作間的潔凈度應達到10000級,室內溫度保持在20℃~24℃,濕度保持在45%~60%,超凈臺潔凈度應達到100級。無菌室應每月檢查菌落數,在無菌室或超凈工作臺開啟的狀態下,取內徑90mm的無菌培養皿若干,無菌操作分別注入融化并冷卻至約45℃的平板計數瓊脂培養基的15mL,放至凝固后,倒置于36℃±1℃培養箱培養48h,證明無菌后,取平板3~5個,分別放置在工作位置的左中右等處,開蓋暴露30分鐘后,倒置于36℃±1℃培養箱培養48h,取出檢查。100級潔凈區平板雜菌數平均不得超過1個菌落,10000級的潔凈室平均不得超過3個菌落,如超過限度,應對無菌室進行徹底消毒,直至重復檢查合乎要求為止。
    (2)無菌室應保持清潔整齊,室內僅存放必須的檢驗用具如酒精燈、酒精棉、打火機、鑷子、接種環、剪刀及玻璃筆等。嚴禁堆放雜物,以防污染。
    (3)無菌室應備有工作濃度的消毒液,如5%的甲酚溶液,75%的酒精,0.1%的新潔爾滅溶液等等。
    (4)需要帶入無菌室使用的儀器、藥品、玻璃器皿等一切物品,均應包扎嚴密或應經適宜的方法滅菌。如培養皿、吸管用不銹鋼筒裝好在160℃~170℃的干燥箱中滅菌1h~2h;生理鹽水用高壓滅菌器于121℃滅菌20分鐘等。
    (5)無菌室使用前必須打開無菌室和緩沖間的紫外燈輻照30分鐘以上,并且同時打開凈化風機進行換氣。在紫外燈關閉后半小時方可進入無菌室進行工作。在樣品檢驗完畢后,應及時清理剩余樣品和各種藥品及玻璃器皿,安全退出后再打開所有紫外燈輻照滅菌30分鐘。
    (6)送檢樣品在檢驗前應保持外包裝完整,不得開啟,以防污染。檢驗前,用75%的酒精棉球消毒外表面,必要時用點燃的酒精棉進行滅菌。
    (7)每次操作過程中,均應做空白對照,以檢查無菌操作的可靠性。
    (8)吸取菌液時,必須用吸耳球吸取,切勿直接用口接觸吸管,如吸管碰到手及其它未滅菌的物體,必須重新更換,以防污染。
    (9)接種針每次使用前后,必須通過火焰燃燒滅菌,待冷卻后,方可接種培養物。
    (10)帶有菌液的吸管、試管等器皿應浸泡在盛有5%的來蘇兒溶液的消毒桶內消毒,24h取出沖洗;培養皿則需在高壓滅菌器中重新滅菌后方可處理營養基,切記不         要直接沖入下水道中,防止阻塞。如有菌液灑在桌上或地上,應立即用5%石碳酸溶液或3%的來蘇兒傾覆在被污染處至少30min,再做處理,工作衣帽等受到菌液污染時,應立即脫去,高壓蒸汽滅菌后洗滌。

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